pda培养基,为什么配出来的pda培养基会有结块?
可能是粉状的物质没有搅拌好吧。
如何制作培养基?
自制培养基方法很多,根据材料,可以有针对性得去选择:
( 1 ) PDA基本培养基:马铃薯200克、琼脂20克、葡萄糖20克、水1,000毫升、pH值自然。
(2)PDA综合培养基:马铃薯200克、琼脂20克、葡萄糖20克、蛋白胨5克、磷酸二
氢钾3克、硫酸镁1.5克,维生素B12―4斤、水1,000毫升,pH自然。
这两种培养基制备首先将马铃署去皮,洗净,切成小块,放入锅中加水1,000毫升煮沸20分钟,然后用纱布过滤取其汁液,将其它称好的原料连同研碎的维生素B1放入滤液中,用清水补足1,000毫升,然后加热使其溶化,用玻璃棒将培养基搅均,然后分装试管。
(3)棉籽皮综合培养基:棉籽皮200克、麸皮50克、琼脂20克、葡萄糖20克、蛋白胨3克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁1.5克、维生素B12-4片,水1,000毫升、pH值自然。
(4)木屑、麸皮培养基:木屑(阔叶树)100克,麸皮50克、蛋白胨5克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁2克、琼脂20克、葡萄糖20克、水1,000毫升、pH值自然。
(5)麸皮培养基:麸皮100克,琼脂20克,葡萄糖20克,蛋白胨3克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁2克、水1,000毫升,pH值自然。
以上三种培养基的制备方法基本相同,首先将棉子皮,木屑或麸皮放入锅中,加水1,000毫升水,加热煮沸30分钟,然后用四层纱布过滤,取出过滤液,加入其它原料,补足1,000毫升液体,再加热使各材料溶化后即可。
马铃薯琼脂培养基要冷却到多少度?
马铃薯琼脂培养基要冷却到55度左右
PDA培养基配方与配制方法
马铃薯提取物 4.0 g
葡萄糖 20.0 g
琼脂粉 15.0 g
pH 5.6±0.2
配制方法:
1. 称取本品39g,加水1000mL,煮沸1分钟至完全溶解。
2. 121度高温蒸汽灭菌15分钟。
3. 冷却至55度左右时,加5%酒石酸或10%乳酸(过滤除菌),调节pH至3.5。加入金霉素4mL(10mg/mL)或1mL(25mg/mL)
步骤3可选。
配制方法二:
去皮马铃薯 200.0 g
葡萄糖 20.0 g
琼脂粉 20.0 g
1. 称取去皮的马铃薯200g,加水1000mL,煮沸30分钟。
2. 过滤后加入20g葡萄糖、20g琼脂粉。
3. 121度高温蒸汽灭菌15分钟。
4. 冷却至55度左右时,加5%酒石酸或10%乳酸(过滤除菌),调节pH至3.5。
5. 冷却至55度左右时,加入金霉素4mL(10mg/mL)或1mL(25mg/mL)。
pda培养基粉使用方法?
马铃薯 200克 葡萄糖 20克
琼脂 15~20克 自来水 1000毫升
自然PH 1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性 (1)称量和熬煮
按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
不适合培养霉菌的培养基是?
一般培养细菌的,霉菌成长不行。
霉菌固体培养基通用的一般是PDA培养基.
① 马铃薯 300克,葡萄糖 20克,琼脂 15~20克,自来水定容至1000ml.
② 具体步骤:马铃薯先洗净去皮,再称取300g切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,加热,再据实际实验需要加琼脂,继续加热搅拌混匀,待琼脂融完后,加入葡萄糖,搅拌均匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者倒平板,冷却后贮存备用.