质粒转化，把质粒转入细胞的方法步骤是什么啊请教一下？
要看你是什么细胞，是想过表达还是knock down一个基因，稳转还是瞬转。
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1] 体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
细菌基因转移和重组的类型及其主要差异？
1转化是受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象
2转导是通过缺陷噬菌体为媒介，将供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中，通过交换与整合而使后者获得前者部分遗传性状的现象
3接合是指供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触，把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新性状的现象。
差别表解如下：
比较项目 转化 转导 接合
1转移的基因 游离的DNA片段 DNA片段 F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段
2基因转移的方式 受体菌直接吸收 缺陷噬菌体携带 性菌毛为媒介使细胞间暂时沟通
3基因重组的范围 个别或少数基因 个别或少数基因 范围变化较大，从个别或少数基因到部 分染色体都有可能
克隆载体名词解释？
克隆载体通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体，在载体上插入合适大小的 外源DNA片段，并注意不能破坏载体的自我复制性质。
将重组后的载体引入到宿主细胞中，并在宿主细胞中大量繁殖。
常见的载体有质粒、噬菌粒、酵母人工染色体。
克隆载体的要求：
①能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力。
②容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好。
③容易插入外来核酸片段，插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。
④容易从宿主细胞中分离纯化出来，这才便于重组操作。
⑤有容易被识别筛选的标志，当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。
如何将真核生物基因转入原核生物？
原核生物一般都有质粒，可以把真生物的基因连接在质粒上再导入原核细胞即可。所需要的酶是：切割质粒的限制性内切酶、将二者连接完整的连接酶。
步骤：提取原核细胞的质粒、用同一种限制酶切割提取目的基因 → 用限制酶切割质粒 → 用连接酶连接完整 → 导入原核细胞