蛋白质含量检测，双缩脲试剂检验蛋白质的原理和条件？
双缩脲法
用于鉴定蛋白质的分析方法
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10mg。
基本信息
中文名
双缩脲法
外文名
Biuret method
成分
氢氧化钾、硫酸铜、酒石酸钾钠
名词解释
双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，可延长试剂的使用寿命。
基本概况
实验原理
双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能够以一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差，不适合微量蛋白的测定。
试剂与器材
1. 试剂：
1.
1. 试剂：
（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。
（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4·5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。此试剂可长期保存。若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。
2. 器材：
1.
2. 器材：
可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。
操作方法
1.
标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横坐标，光吸收值为纵坐标绘制标准曲线。
2、样品的测定：取2~3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。
大于3就说名有添加剂是真的吗？
这个说法是不对的，属于瞎猜，一般牛奶蛋白质大约在3%，良种牛、好的喂养和管理，可以达到3.5%左右，而有些牛种，比如水牛、牦牛，产出的奶蛋白质可以达到5%以上；此外，如果产品添加了添加剂，是必须在包装上进行标示的，所以到底有没有加添加剂，可以看看产品配料表标示的内容。
国家标准中明确规定乳制品中蛋白质含量不得低于多少？
因为GB 25190灭菌乳，GB 19645巴氏，这些标准强制要求蛋白质含量下限。 反正是强制要求的东西，标注出来当卖点也不错。
100克鱼有多少克蛋白质？
不同的鱼100克鱼肉的含蛋白质的含量不同，如黄鱼含17.6%、带鱼含18.1%、鲐鱼含21.4%、鲢鱼含18.6%、鲤鱼含17.3%、鲫鱼含13%。鱼肉所含的蛋白质都是完全蛋白质，而且蛋白质所含必需氨基酸的量和比值最适合人体需要，容易被人体消化吸收。
另外，鱼肉的肌纤维比较短，蛋白质组织结构松散，水分含量比较多，因此，肉质比较鲜嫩，和禽畜肉相比，吃起来更觉软嫩，也更容易消化吸收。所 以，可以看出，鱼类具有高蛋白、低脂肪、维生素、矿物质含量丰富，口味好、易于消化吸收的优点。
补蛋白质是吃蛋黄好些？
为了补充蛋白质当然是吃蛋白啦，蛋黄主要含的是脂类，绝大多数的蛋白质在蛋清啊。吃蛋黄是补不了蛋白质的。
这里有两个问题就是，要吃多少蛋白才能达到你的补充目的，还有蛋黄要一块吃还是不吃。
首先一个鸡蛋含有多少蛋白质呢？大概是7克左右，鸡蛋大点小点会有差异，相当于200ml牛奶，或者1两肉的蛋白含量吧。
中国居民膳食指南建议 健康成年男性一天的蛋白质摄入 65g左右，女性55g左右。优质蛋白质要达到总量的三分之一，所以男女分别是22g，18g。
优质蛋白质有哪些？鸡蛋、牛奶、大豆类、鱼虾海鲜、肉类。每天1个鸡蛋，250ml牛奶，2两肉加起来有刚好在20g左右。也就是说这是每天最基本要吃的。
那如果你要健身增肌，就远远不够了。所以你在这个基础上，如果再吃两个鸡蛋白，或者1~2瘦肉或者鸡肉，那么就又有差不多20g左右优质蛋白质的摄入。
所以还是看你平时的饮食是咋样的。
再说要不要吃蛋黄，蛋黄的胆固醇高？对就数量来说一个蛋黄就达到一个健康成年人的一日胆固醇推荐量。但是胆固醇也有好坏之分，鸡蛋的胆固醇是可以帮助体内坏的胆固醇代谢，每天坚持吃鸡蛋对健康非常有益处，一天吃两个蛋黄完全没有问题啊。
也就是说，你每天可以吃3个以上蛋白，但蛋黄最多吃2个就好。但是不要突然的大量增加的蛋白质摄入。你也不要吃十几二十个鸡蛋哈，慢慢来，不是吃多少就能补多少的。我们的身体大多适宜缓而不适宜太多激进。
祝好咯~